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技术资讯一、技术简介CLIP(Cross-linkingimmunoprecipitation,交联免疫共沉淀)通过结合UV交联和免疫共沉淀的方法来分析蛋白与RNA相互作用的结合位点。二、技术原理CLIP技术利用紫外线照射使细胞内的RNA与RNA结合蛋白(RBP)发生共价交联,随后通过免疫沉淀的方法富集与特定RBP结合的RNA片段,再经过逆转录和高通量测序等步骤,获取RBP在体内的RNA结合位点和结合序列信息。三、应用场景1.蛋白质-RNA相互作用研究:确定特定蛋白质在体内的RNA结...
一、技术简介RIP(RNAImmunoprecipitation,RNA免疫沉淀)技术是一种用于研究细胞内RNA与蛋白质相互作用的关键实验方法,能够揭示RNA结合蛋白(RBP)在转录后调控中的功能机制。二、技术原理RIP利用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,通过分离纯化,对结合在复合物上的RNA进行RT-PCR验证或测序分析,结果更具生物学说服力。三、应用场景1.基础机制:解析RNA结合蛋白(如AGO2、Polycomb复合物)的功能及RNA调控网络。2....
一、技术简介ChIP(染色质免疫共沉淀)是一种研究蛋白质与DNA相互作用的关键技术,广泛应用于转录因子结合位点鉴定、表观遗传修饰分析等领域。二、技术原理利用抗原抗体的特异性结合,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,能够真实地反映结合在DNA序列上的调控蛋白。三、应用场景1.转录调控研究:鉴定转录因子(如p53、NF-κB)的DNA结合位点。2.表观遗传学:分析组蛋白修饰(如H3K27me3)在基因沉默中的作用。3.疾病机制:探索癌症中异常蛋白(如MYC)的基因组结合模式。...
一、技术简介IP(免疫沉淀,Immunoprecipitation)和Co-IP(免疫共沉淀,Co-Immunoprecipitation)是研究蛋白质功能及相互作用的核心技术,广泛应用于分子生物学和细胞生物学领域。二、技术原理IP通过特异性抗体与目标蛋白结合,利用抗体将靶标蛋白(即抗原)分离出来,从而检测某一种蛋白的表达情况;而CO-IP是在IP基础上,验证蛋白质间的相互作用。通过捕获一个蛋白(诱饵蛋白),检测与其结合的互作蛋白(靶蛋白),从而特异性富集所研究的目的蛋白,进...
在细胞生物学研究、生物制药等前沿领域,细胞培养基为细胞生长繁衍提供关键养分与适宜环境。掌握其正确使用方法,才能让细胞蓬勃生长,助力科研突破与产业革新。开启培养前,依据细胞种类、实验目的筛选培养基,如贴壁生长的癌细胞系多用含血清、葡萄糖、氨基酸及多种生长因子的RPMI-1640培养基;原代细胞培养常选营养成分丰富、成分贴近体内环境的DMEM培养基,且需添加适量抗生素,像青霉素、链霉素,防止微生物“偷袭”,搭建安全“保育箱”。配制环节严格按说明书称取培养基粉末,溶解于超纯水中,用...
原代心肌细胞间质并非单一物质,而是由多种成分巧妙交织而成的复杂网络。其中,胶原蛋白是极为重要的组成部分。它如同坚韧的绳索,为心肌细胞提供稳固的支撑框架。在心脏每一次有力的搏动中,胶原蛋白承受着巨大的机械应力,确保心肌细胞不会因过度拉伸或扭曲而受损,维持着心脏结构的完整性,使其能够在漫长的生命周期中持续稳定地工作。弹性纤维也在其中扮演着重要角色。它们赋予心肌组织一定的弹性和回缩力。当心脏收缩时,弹性纤维被拉伸储存能量;而当心脏舒张时,又能释放能量辅助心脏恢复到原来的形状,让心脏...