A2780 人卵巢癌细胞

A2780 人卵巢癌细胞

细胞名称：A2780 人卵巢癌细胞

英文名称：Human Ovarian Cancer Cells

种属来源：人

组织来源：卵巢

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养基：89% RPMI-1640培养基 + 2mM 谷氨酰胺 + 10% FBS + 1%双抗

生长条件：气相：95%空气、5%二氧化碳；温度：37℃；湿度：70~80%

传代方法：1:2至1:4，每周 2~3次

冻存条件：细胞冻存液：80%培养基 + 10%血清 + 10%DMSO，梯度降温，液氮储存

细胞用途：仅供研究之用

细胞名称：CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞亚株

英文名称：Chinese Hamster Ovary Cells

英文名称：CHO K1，CHOK1，CHO cell clone K1，GM15452

种属来源：中国仓鼠

组织来源：卵巢

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养基：89% F12K培养基(SIGMA,货号N3520，添加NaHCO3 2.5g/L)+ 10% FBS + 1%双抗

生长条件：气相：95%空气、5%二氧化碳；温度：37℃；湿度：70~80%

传代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

冻存条件：细胞冻存液：80%培养基 + 10%血清 + 10%DMSO，梯度降温，液氮储存

细胞用途：仅供研究之用

细胞名称：SK-OV-3 人卵巢癌细胞

英文名称：Human Ovarian Cancer Cells

别称：SKOV-3，SKOV3，Skov3，SKO3

种属来源：人

组织来源：卵巢腺癌，腹水转移

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养基：89% McCoy's 5A培养基 + 10% FBS + 1%双抗

生长条件：气相：95%空气、5%二氧化碳；温度：37℃；湿度：70~80%

传代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

冻存条件：细胞冻存液：80%培养基 + 10%血清 + 10%DMSO，梯度降温，液氮储存

细胞用途：仅供研究之用

细胞培养操作

1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

注意：a) 该细胞贴壁较慢，建议复苏、传代后让细胞贴壁48-72h后再进行后续实验操作。 b) 使用0.25%(w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA消化细胞。 c) MCF7是一种生长缓慢的细胞系，它会以松散的三维团簇的形式出现，并伴有一些漂浮的活细胞。悬浮的活细胞可以通过离心后重新加入到培养瓶中培养。在复苏后前二代该细胞会出现贴壁缓慢的情况，是正常现象。松散的三维团簇细胞慢慢会扩散形成一个扁平的单层细胞。如果生长速度比正常情况慢，可以尝试另一批FBS（即血清批次的促生长能力可能不同）。此外，将血清浓度增加到20％也可能有助于改善生长。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按1：2~3比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×10⁶~1×10⁷/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞破碎形成碎片，是正常现象。贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

5. 建议客户收到细胞后，前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

6. 该细胞仅供科研使用。

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家专注于生命科学领域提供相关试剂产品和服务的生物高科技企业，坐落于上海聚科生物产业园。公司提供种类齐全的细胞系和多种原代细胞、质量稳定的细胞培养试剂产品、成熟高效的技术服务。本着“守正创新，科学严谨"的理念，我们以高标准塑造行业品牌，以全新视野构建现代企业，勇于探索和创新。公司业务范围涉及全国各省市自治区，与国内多家医院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作关系，赢得了良好的市场声誉和广泛的认可，我们保证将继续为广大科研用户提供专业、高效、优质的产品及服务！

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