细胞外泌体的组成都包括什么？

细胞外泌体是细胞分泌的大小约为30-150nm的纳米物质，是细胞外囊泡的一类，结构类似于细胞，磷脂双分子层表面具有多种特异性膜蛋白，内部搭载着多种蛋白质、RNA、DNA等重要生物信号物质，广泛分布于血液、尿液、脑脊液、唾液、乳汁、胆汁等各种体液中。外泌体的来源细胞种类非常丰富，几乎在人体血液、尿液、母乳和唾液等多种体液中都能发现它的踪迹。可传递包括DNA、RNA、miRNA、脂质和蛋白质在内的多种生物活性物质，同时保护包裹的内含物免受核酸酶和蛋白酶，以及外界坏境变化引起的降解...

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细胞增殖分析（CCK-8 法）

CellCountingKit-8（简称CCK-8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。CCK-8&MTT方法比较方法优点缺点CCK-8法灵敏度高、不使用有机溶剂、检测迅速、重复性好价格较MTT贵、CCK8试剂的颜色为淡红色、与含酚红的培养基颜色接近，容易漏加或多加MTT法价格便宜操作步骤较多，需要使用有机试剂，灵敏度不如CCK-8，多数需要配制，检测时间长，细胞毒性较高一、原理：CCK-8是MTT的升级产品，其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧...

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从肝脏组织中制备细胞核

一、材料与仪器：大鼠、裂解缓冲液、浓蔗糖溶液、超速离心机、组织研磨器二、实验步骤：1.配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液（PMSF在使用前添加），冰上放置。裂解缓冲液:①0.25mol/L蔗糖网织红细胞标准缓冲液（RSB）②0.25mol/L蔗糖（超级纯）③10mmol/Tris-HCl(pH7.4)④10mmol/LNaCl⑤3mmol/LMgCl2⑥1mmol/LDTT⑦0.5mmol/LPMSF(用前从溶于乙醇的100mmol/L贮存液中添加）浓蔗糖溶液:①2mol/L蔗糖RS...

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从哺乳动物细胞或组织分离DNA

材料与仪器：细胞、TBS抽提缓冲液、离心管实验步骤：步骤1：根据样品类型，从下列方法中选一个作为步骤1进行操作。(1)细胞样品①单层培养的细胞以用冰预冷的TBS将单层细胞洗涤2次，用刮棒把细胞刮入约0.5ml的TBS中，将细胞悬液转移到冰浴的离心管中，用1mlTBS冲洗培养皿，并入离心管中的细胞悬液。于4℃以1500g离心10分钟以收获细胞。用5~10倍体积经冰预冷的TBS重悬细胞并再度离心。用TE(pH8.0）重悬细胞，使细胞密度为5x107细胞/ml，转移至一个三角烧瓶中...

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细胞冻存和复苏实验

实验方法原理：细胞冻存和复苏的基本原理是慢冻快解冻，已被证明能最大限度地提高细胞活力。目前常用甘油或二甲基亚砜作为细胞低温保存的保护剂。这两种物质可以提高细胞膜对水的渗透性，再加上缓慢的冷冻可以使细胞内的水从细胞中渗出，减少细胞内冰晶的形成，从而减少冰晶形成对细胞的损伤。复苏细胞时应采用快速熔融的方法，以保证细胞外晶体在短时间内熔融，以避免因水缓慢熔融进入细胞形成细胞内重结晶而对细胞造成损伤。实验材料：细胞试剂、试剂盒：D-Hanks液、小牛血清、培养液、青霉素、链霉素、胰蛋...

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标记细胞株要如何保存？

细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经传代成功后即为细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限，可称为有限细胞系，如可以连续培养，则称为连续细胞系，培养50代以上并无限培养下去。所以细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。从培养代数来讲，可培养到40-50代。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间...

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细胞培养基介绍

细胞培养基的概念01细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境，并提供细胞营养和促进细胞生长增殖的基础物质。细胞培养基是细胞培养的基础，它为动物细胞的健康快速成长提供营养物质。所以，只要用到细胞进行生物技术产品的生产制造，就势必少不了细胞培养基。培养液或培养基，英文都是medium。当它是粉剂时，倾向性地称为培养基，而将粉剂配成液体后，多称为培养液。培养液中常需补加血清、抗生素等成分。细胞培养基的分类02培养基主要有：天然细胞培养基、合成细胞培养基和无血清细胞培养基等。天然...

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C57小鼠皮肤成纤维细胞原代培养的方法

实验方法1.将实验小鼠脱颈处死，75%乙醇浸泡5min，固定，备皮，取背部皮肤至于含双抗的冷PBS缓冲液中。2.仔细剥离脂肪，血管等多余组织，PBS清洗，加胰酶消化1h。3.分离真表皮，去除表皮后，PBS清洗3次。4.将真皮部分于培养皿内剪碎，加入适量胰酶，转移至15ml离心管内，37℃恒温水浴消化1h。5.消化结束后，加入H-DMEM*培养基终止反应，1000rpm离心5min，弃上清。6.PBS清洗一遍，离心弃上清。7.将清洗后的组织块均匀铺于6cm培养皿内，加入2ml*...

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