RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞

产品基本信息

产品编号：KMCC-001-0066

细胞名称：RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞

英文名称：Human Normal Prostate Epithelial Cells

别称：RWPE1，RWPE 1

种属来源：人

组织来源：前列腺正常细胞

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养基：K-SFM + 0.05 mg/ml BPE + 5 ng/ml EGF+ 1% PS（a. 细胞在无血清培养体系中培养，其贴壁能力较弱，建议传代后静置24小时再进行后续操作。b. 细胞密度建议保持在4万~ 7万cells/cm2，接种密度建议在2万~4万活细胞/cm2。c. 使用0.05%胰酶消化细胞。同时由于K-sfm为无血清培养液无法终止胰酶消化，所以消化完成后要通过添加2%FBS（用D-PBS稀释）或等体积的0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化并离心去除胰酶，再进行后续操作）

生长条件：气相：95%空气、5%二氧化碳；温度：37℃；湿度：70~80%

传代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

冻存条件：采用细胞冻存液，梯度降温，液氮储存

细胞用途：仅供研究之用

一位54岁白人男性的正常前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人乳头瘤病毒18（HPV-18）进行转化，建立了RWPE-1。据报道，RWPE-1细胞在三维Matrigel培养时，在雄激素刺激下，形成腺胞（acini）并向培养基中分泌PSA。当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时，RWPE-1细胞也能形成腺胞并产生PSA。来源于RWPE-1的细胞用Kirstin鼠肉瘤病毒（Ki-MuSV）转染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2细胞和 RWPE2-W99细胞。另外，用MNU处理RWPE-1，建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株。它们分别是WPE1-NA22, WPE1-NB14, WPE1-NB11和 WPE1-NB26细胞。据报道，RWPE-1细胞经过检测后发现乙肝病毒、丙肝病毒和人免疫缺陷病毒都呈阴性。PCR证实该细胞系HPV病毒DNA序列呈阳性。每个批次均通过本库支原体检测，结果阴性。在我库通过STR鉴定，数据上94%吻合。STR结果如下：D5S818: 12,15；D13S317: 8,14；D7S820: 10,11；D16S539: 9,11；vWA: 18；THO1: 8,9.3；Amelogenin: X,Y；TPOX: 8,11；CSF1PO: 13

产品编号：KMCC-001-0056

细胞名称：T84 人结肠腺癌肺转移细胞

英文名称：Human colon adenocarcinoma lung metastasis cells

别称：T-84，T 84

种属来源：人

组织来源：结直肠癌 取材转移灶： 肺

细胞形态：上皮细胞，多角形

生长特性：贴壁生长

培养基：DMEM/F12 培养基＋5% FBS ＋1% P/S（生长时，这株细胞应维持高密度生长，至少1/4满）

生长条件：气相：95%空气、5%二氧化碳；温度：37℃；湿度：70~80%

传代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

冻存条件：细胞冻存液：95% *培养液 + 5% DMSO，梯度降温，液氮储存

细胞用途：仅供研究之用

产品编号：KMCC-001-0053

细胞名称：RD 人横纹肌肉瘤细胞

英文名称：Human Rhabdomyosarcoma Cells

别称： R D，RD-2，RD 2，130T，130-T，130 T，TE-32，TE 32，TE32，TE 32.T，Te 32.T，人恶性胚胎横纹肌瘤细胞

种属来源：人

组织来源：肌肉，横纹肌肉瘤

细胞形态：纺锤形和大的多核细胞

生长特性：贴壁生长

培养基：89% DMEM 培养基 + 10% FBS + 1%双抗

生长条件：气相：95%空气、5%二氧化碳；温度：37℃；湿度：70~80%

传代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

冻存条件：采用细胞冻存液，梯度降温，液氮储存

细胞用途：仅供研究之用

细胞培养操作

1. 冻存细胞的复苏

1.1 在超净台中取配好的*培养液5ml到15ml离心管中放至室温备用。

1.2 快速将干冰或液氮保存的细胞株，放入37℃的水浴锅后不停晃动冻存管，使其解冻并达到37℃，此过程尽量保持在3分钟内完成。（备注：此处注意，管身或管内的液氮挥发完后才可放入，否则有炸裂风险）

1.3 将化冻的细胞液快速转移至上述准备好培养基中，1000rpm 、4min离心收集细胞并传代，传代方法如下：

2. 细胞传代处理

2.1 待长满瓶底至80%以上时，贴壁细胞弃掉培养瓶中的培养基，用1X PBS洗两遍。

2.2 加1mL 0.25%的胰酶溶液，置于37℃培养箱中消化2-3分钟，直至看到有细胞从瓶底上脱落分离。

2.3 加入2mL*培养基终止消化，轻轻吹打将所有细胞从培养瓶表面吹落并转移到离心管中，1000rpm 、4min离心收集细胞。

2.4 收集好的细胞用*培养基重悬，并轻轻吹打悬浮，若无特别说明，就按1:2~1:3的比例铺新的培养瓶，放进培养箱继续培养（每个细胞培养条件不同，大部分细胞5%CO2、37℃恒温培养）。

3.细胞冻存处理

3.1 收集方法同上，

3.2 收集好的细胞用细胞冻存液（若无特殊说明，一般细胞冻存液成分为：10%血清+80%培养基+10%DMSO）悬浮，并按4℃、1h，-20℃、30min，-80℃过夜，液氮长期的温度梯度进行保存。

细胞功能研究相关检测：

2D细胞培养和观察

3D细胞培养和观察

原代细胞分离/培养/鉴定

细胞增殖/毒性检测（MTT 法/CCK8 法）

细胞凋亡检测（AnnexinV FITC/PI双染流式法/Tunel法）

细胞周期检测（PI染料标记流式法）

细胞迁移/侵袭检测（划痕法/Transwell法）

流式细胞分选（流式细胞术）

细胞免疫荧光检测

小管形成实验（tube formation，体外血管生成实验）

细胞克隆形成实验

细胞外泌体分离与鉴定

慢病毒包装及稳转株筛选

电生理检测

个性化细胞实验（药物筛选等）

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家专注于生命科学领域提供相关试剂产品和服务的生物高科技企业，坐落于上海聚科生物产业园。公司提供种类齐全的细胞系和多种原代细胞、质量稳定的细胞培养试剂产品、成熟高效的技术服务。本着“守正创新，科学严谨"的理念，我们以高标准塑造行业品牌，以全新视野构建现代企业，勇于探索和创新。     细胞系(带STR鉴定) | 原代细胞 | 细胞培养基 | 血清 | 细胞培养添加因子 | 标记细胞 | 耐药细胞 | 生化检测试剂盒 | WB试剂 | 抗体 等；ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 16S rRNA测序分析 | Pull down实验 | RIP 实验 | ChIP实验 | Co-IP实验 | 质谱检测 | WB检测 | PCR检测 | 细胞培养/增殖/凋亡/周期/迁移/侵袭/自噬 | 活体成像 | 免疫组化 | 电镜检测 | micro-CT 检测  等。更多信息，欢迎垂询上海昆盟生物科技有限公司！