2021-923
RNApulldown实验技术1.实验原理RNApulldown是体外研究RNA与蛋白互作的重要技术。该技术是用生物素标记体外转录的靶RNA分子，再用链霉亲和素纯化出与靶RNA结合的蛋白复合体，洗脱得到RNA结合蛋白质。再通过westernblot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与靶RNA结合；或通过质谱仪检测可以筛选出与靶RNA结合的蛋白。生物素与链霉亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用；其中活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下，与已知的几乎所有生物大分子偶联。因此...
查看更多2021-923
DNApulldown实验技术1.实验原理DNApulldown是体外研究DNA与蛋白互作的有力工具。该技术将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上，再与细胞核蛋白孵育，纯化出与DNA片段互作的蛋白，洗涤洗脱得到的蛋白产物，做Westernblot检测特定蛋白是否与靶DNA片段结合；做质谱鉴定即可筛选出与DNA片段可能互作的蛋白信息(如：转录因子、组蛋白等)。生物素与链霉亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用；其中活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下，与已知的几乎...
查看更多2021-923
GSTPulldown实验技术1.实验原理Pulldown技术是将"诱饵"蛋白与一种易于纯化的配体标签（如：GST标签、His标签）进行融合表达，而带标签的诱饵蛋白能被特异结合该标签的固相亲和配基捕获，形成"次级亲和支持物"，用于纯化与诱饵蛋白相互作用的其他蛋白。纯化产物洗脱后，经Westernblot验证或LC-MS/MS，即鉴定与诱饵蛋白互作的蛋白。1988年Smith等利用谷胱甘肽-S-转移酶（GST）融合标签从细菌中一步纯化出GST融合蛋白。从此，GST融合蛋白在蛋白...
查看更多2021-922
细胞凋亡人体内的细胞注定是要死亡的，有些死亡是生理性的，有些死亡则是病理性的，有关细胞死亡过程的研究，已成为生物学、医学研究的一个热点。已知的细胞死亡方式起码有两种，即细胞坏死与细胞凋亡(apoptosis)。细胞坏死是早已被认识到的一种细胞死亡方式，而细胞凋亡则是逐渐被认识的一种细胞死亡方式。此图片来源于网络细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象，在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅...
查看更多2021-917
中枢性性早熟（CPP）是儿科内分泌的常见疾病，发病率较高，且逐年增加趋势明显。CPP可以导致患者或者家长出现社会、心理问题，而且还可能严重损害儿童的终身高。因此，CPP是儿科内分泌医生密切关注的疾病之一。CPP发病原因目前尚不明确，可能是由于某种因素促发了下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）神经元，使其提前活化，通过分泌大量的GnRH，进而激活下丘脑-垂体-性腺轴。5-羟色胺（5-HT）最初在血清中发现，又名血清素，是一种吲哚衍生物，它广泛存在于哺乳动物中。5-HT由色氨酸代...
查看更多2021-917
2021-917
人的生存离不开氧气。如果你感觉很长一段时间里整天无精打采、昏昏欲睡，在排除睡眠不足的因素外，那么你有可能是血液中缺氧了。血液除了能在身体内流动，携带能量、废物等，最主要的功能就是携带氧气，这是它的基本功能之一。如果血液缺氧，严重时就会导致器官病变，最常见的就是心梗、脑梗等。近年来，低氧(Hypoxic)于生物机体及细胞的生理作用及其分子机制研究越来越受到医学科研学者的关注。低氧培养的适用研究领域近30年来与“低氧诱导”相关的文章统计(此项数据来源于Pubmed数据库)细胞是生...
查看更多2021-916
细胞焦亡是什么？细胞凋亡（Apoptosis）是经典的细胞死亡方式，但随着研究的不断深入，很多细胞死亡现象并不能用细胞凋亡来解释，随着研究的深入，科学家又陆续发现了一些新的细胞死亡新机制。细胞焦亡（Pyroptosis）便是近年来发现并证实的一种炎症程序性细胞死亡，其特征为依赖于炎性半胱天冬酶（主要是caspase-1，4，5，11），并伴有大量促炎症因子的释放。细胞焦亡可由各种病理刺激引发，如中风、心脏病发作、癌症、感染等。按照激活机制，细胞焦亡可分为Caspase-1依赖...
查看更多
当前位置：
