2022-91
2022-89
细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经传代成功后即为细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限，可称为有限细胞系，如可以连续培养，则称为连续细胞系，培养50代以上并无限培养下去。所以细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。从培养代数来讲，可培养到40-50代。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间...
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2022-714
实验方法1.将实验小鼠脱颈处死，75%乙醇浸泡5min，固定，备皮，取背部皮肤至于含双抗的冷PBS缓冲液中。2.仔细剥离脂肪，血管等多余组织，PBS清洗，加胰酶消化1h。3.分离真表皮，去除表皮后，PBS清洗3次。4.将真皮部分于培养皿内剪碎，加入适量胰酶，转移至15ml离心管内，37℃恒温水浴消化1h。5.消化结束后，加入H-DMEM*培养基终止反应，1000rpm离心5min，弃上清。6.PBS清洗一遍，离心弃上清。7.将清洗后的组织块均匀铺于6cm培养皿内，加入2ml*...
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外泌体是细胞分泌到胞外的一种囊泡，其大小为30-150nm，具有双层膜结构和茶托状形态，含有丰富的内含物（包括核酸、蛋白和脂质等），参与细胞间的分子传递。外泌体广泛存在于细胞培养上清以及各种体液中，细胞外泌体研究是近些年研究的热点。细胞外泌体主要原理是根据外泌体的密度、粒径、沉降系数和亲和力等差异进行分离，提取方法包括传统的差速离心、密度梯度离心，以及后来发展的超滤法、聚合物沉淀法、免疫分离、隔离筛选法、体积排阻色谱法等。这些方法各有利弊。细胞外泌体研究常见问题：1、培养细胞...
查看更多2022-75
1.将新生24h的SD大鼠用75%乙醇浸泡5min，开胸，取出心脏后于含有双抗的预冷过的D-HANKS中漂洗两遍，移入超净台。2.仔细剪除大血管，左右心房及右心室和室间隔，保留左心室，去除内、外膜，PBS清洗。3.用眼科剪将心室肌剪碎至约1mm3，滴加1ml胎牛血清，均匀接种于6cm细胞培养皿内，组织块间隔1-2mm，放入5%CO2，37℃恒温培养箱内培养。4.4小时后去除培养皿，加入3ml含有20%FBS和1%双抗的H-DMEM培养基，继续培养。5.一般情况下48小时后可见...
查看更多2022-630
一.实验方法1.多聚赖氨酸（Poly-D-Lysine）包被培养板的制备：原代分离进行前一天，用PBS缓冲液配制终浓度为0.1mg/ml的多聚赖氨酸工作液，0.22μm滤膜过滤除菌，于超净工作台内吸取1ml加入六孔板内，确保覆盖板底，静置孵育30min后吸出（可回收反复使用2-3次），用无菌水清洗培养板，置于超净台内晾干，照紫外过夜。2.次日，取出生24h以内的SD大鼠，75%乙醇浸泡消毒5min。3.棉球吸干乳鼠体表的乙醇，迅速断头，浸泡于冰冷的含有2%双抗的PBS缓冲液中...
查看更多2022-614
研究中常用的细胞系/株系是现成的，我们只需要进行细胞传代和种子保存。然而，这些细胞系往往因长期体外培养而失去原有的生物学特性，对药物治疗的反应差距越来越大。因此，越来越多的人选择原代细胞。来源于胚胎、组织、器官和外周血，经特殊分离方法制备的原代培养细胞称为原代细胞。原代细胞培养，也称为原代培养，是从供体获得的组织细胞在体外的培养。原代细胞是接近和最能反映体内生长特性的细胞，适用于药敏试验、细胞分化等实验研究。原代细胞分离培养都有哪几种方法？1、组织培养法组织培养是一种常见、简...
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