原代细胞分离培养

一、原代细胞分离培养介绍

原代细胞(primary cell)是指从生物体获取细胞直接培养。常用的原代细胞分离培养方法有组织块培养和分散组织培养。

组织块培养：是将剪碎的组织块直接移植在培养瓶壁上，加入培养基后进行培养。

组织块培养法是常用的、简便易行和成功率较高的原代培养方法。将组织块剪切成小块后，接种于培养瓶，组织小块贴壁24h或更长时间后，细胞就从组织四周游出。但由于在反复剪切和接种过程中对组织块的损伤，并不是每个小块都能长出细胞。用于组织块培养的培养瓶可根据不同细胞生长的需要作适当处理，如：预先涂以鼠尾胶原薄层，以利于上皮样细胞等的生长。

分散组织培养：是将组织块从机体中取出离散成单个细胞，置于合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。分散组织培养也是常用的一种原代细胞培养方法，通常用机械法或化学法将组织块分散为单细胞。如欲从胎儿或新生儿的组织分离到活性较好的游离细胞，经典的方法是用蛋白水解酶(如胰蛋白酶和胶原酶)消化细胞间的结合物，或用金属离子螯合剂(如EDTA)除去细胞互相粘着所依赖的Ca2+，再经机械轻度振荡，使之成为单细胞。

二、注意事项

1. 取材的组织要尽快培养。如若不能及时培养，可将组织浸泡于培养液内，放置于冰浴或4℃冰箱中，如果组织块很大，应切成1cm3以下的小块再低温保存，但时间不能超过24h。

2. 从消化道、周围有坏死组织等污染因素存在的区域取材，可用含500～1000u/ml的青-链霉素BSS液漂洗5～10min，或用10%达克宁注射液冲洗浸泡10min再作培养。

3. 组织块不易贴壁，可预先在瓶壁涂薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。

4. 原代培养的1～2d内要特别注意观察是否有细菌、真菌、霉菌的污染，一旦发现，要及时清除。

原代细胞在细胞学研究、遗传学研究、肿瘤研究、药物筛选、细胞移植、类器官培养等众多研究领域备受欢迎，且原代细胞在生物医药领域的应用市场前景广阔。

三、细胞生物学检测

• 2D细胞培养和观察
• 3D细胞培养和观察
• 原代细胞分离/培养/鉴定
  
• 细胞增殖/毒性检测（MTT 法/CCK8 法）
• 细胞凋亡检测（AnnexinV FITC/PI双染流式法/Tunel法）
• 细胞周期检测（PI染料标记流式法）
• 细胞迁移/侵袭检测（划痕法/Transwell法）
• 流式细胞分选（流式细胞术）
• 细胞免疫荧光检测
• 小管形成实验（tube formation，体外血管生成实验）

• 细胞克隆形成实验

• 细胞外泌体分离与鉴定
• 慢病毒包装及稳转株筛选
• 电生理检测
• 个性化细胞实验（药物筛选等）
  细胞模型已经于人类疾病研究和治疗药物的筛选领域中得到广泛应用。我司可根据客户的具体方案提供多种细胞模型的构建及相应的细胞生物学功能检测。

四、细胞系产品(展示部分）详询业务员！！！

五、公司简介  

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家专注于生命科学领域提供相关试剂产品和服务的生物高科技企业，坐落于上海聚科生物产业园。公司提供种类齐全的细胞系和多种原代细胞、质量稳定的细胞培养试剂产品、成熟高效的技术服务。本着“守正创新，科学严谨"的理念，我们以高标准塑造行业品牌，以全新视野构建现代企业，勇于探索和创新。公司业务范围涉及全国各省市自治区，与国内多家医院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作关系，赢得了良好的市场声誉和广泛的认可，我们保证将继续为广大科研用户提供专业、高效、优质的产品及服务！细胞系(带STR鉴定) | 原代细胞 | 细胞培养基 | 血清 | 细胞培养添加因子 | 标记细胞 | 耐药细胞 | 生化检测试剂盒 | WB试剂 | 抗体 等；ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 16S rRNA测序分析 | Pull down实验 | RIP 实验 | ChIP实验 | Co-IP实验 | 质谱检测 | WB检测 | PCR检测 | 细胞培养/增殖/凋亡/周期/迁移/侵袭/自噬 | 活体成像 | 免疫组化 | 电镜检测 | micro-CT 检测  等。更多信息，欢迎垂询上海昆盟生物科技有限公司。