细胞外泌体研究

简要描述：外泌体（Exosome）主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中，直径约为30-150nm，密度1.13-1.21g/mL。外泌体中携带有蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA和脂质成分等。外泌体天然存在于各种体液中，例如：血液、唾液、尿液等，且培养的细胞也可分泌外泌体。我司可为广大科研用户在细胞外泌体研究方面提供助力！

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所属分类：细胞研究

更新时间：2021-10-19

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一、细胞外泌体研究介绍

1、外泌体简介

外泌体(Exosome)主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中，直径约为30-150nm，密度1.13-1.21g/mL。外泌体中携带有蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA和脂质成分等。外泌体天然存在于各种体液中，例如：血液、唾液、尿液、脑脊液和母乳。且体外培养的细胞也可分泌外泌体。

随着对外泌体生物来源、物质构成及运输、细胞间信号传导以及分布的研究，发现外泌体具有多种多样的功能。例如，肿瘤细胞分泌的外泌体能够介导血管再生、肿瘤细胞增殖及免疫逃逸；而树突状细胞源性外泌体则能够引起机体有效的抗肿瘤免疫应答。因此，外泌体的功能取决于其来源的细胞类型，其可参与到细胞信号转导、机体免疫应答、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等过程。

外泌体能够携带功能性蛋白及核酸分子，穿过生物屏障在细胞间传递，发挥重要的细胞通讯功能。因此，在未来，外泌体有望在疾病诊断、疾病给药途径及基因治疗载体方面发挥重要的应用价值。

2、外泌体提取

外泌体是由活细胞分泌的一种亚细胞成分，含有磷脂双分子的膜性分子，依据其形态学和理化性质有不同的外泌体提取方法。目前，外泌体提取的方法有：超速离心法、磁珠免疫捕获法、沉淀或过滤法。目前，采用较多的是超速离心法和试剂盒法。其中，超速离心法依旧是从生物体液或细胞上清中分离外泌体的金标准方法。

3、外泌体鉴定

1. 利用纳米颗粒跟踪分析(NTA)分析外泌体浓度和粒径；

2. 利用透射电镜(TEM)分析外泌体大小和形态；

3. 利用流式细胞仪分析外泌体细胞表面标记(CD9/CD81/CD63)；

4. 通过Western blot(WB)鉴定外泌体marker(CD9/CD81/CD63)。

4、外泌体分析

1. 利用qPCR / 高通量测序等进行外泌体mRNA / miRNA / lncRNA / circRNA表达分析；

2. 利用Label-free / iTRAQ / TMT / SDS-PAGE / WB进行外泌体蛋白质表达分析；

3. 通过外泌体注射动物 / 皮下荷瘤 / 活体成像等进行外泌体动物功能研究；

4. 通过细胞增殖 / 细胞凋亡 / 细胞周期 / 细胞迁移/侵袭等进行外泌体细胞水平功能检测；

5. 利用双荧光素酶报告基因检测进行外泌体miRNA靶基因验证研究；

昆盟生物为助力细胞外泌体研究，可为广大科研用户提供外泌体提取、鉴定、分析及整体科研方案设计。详询我司业务员！！！

二、细胞功能研究相关检测

细胞传代培养和形态观察
3D细胞培养和形态观察（细胞成球培养/类器官培养）
原代细胞分离/培养/免疫荧光鉴定
细胞增殖/毒性检测（MTT 法/CCK8 法）
细胞凋亡检测（AnnexinV FITC/PI双染流式法/Tunel法）
细胞焦亡检测（WB检测GasderminD切割/生化检测Caspase-1和-4活性/ELISA检测IL-1β和-18含量）
细胞周期检测（PI染料标记流式法）
细胞迁移/侵袭检测（划痕法/Transwell法）
流式细胞分选（流式细胞术）
小管形成实验（体外血管生成实验）
细胞克隆形成实验
细胞外泌体分离与鉴定
慢病毒包装及稳转株筛选（基因过表达/敲除）
电生理检测
个性化细胞功能实验（药物筛选等）
细胞模型已经于人类疾病研究和治疗药物的筛选领域中得到广泛应用。我司可根据客户的具体方案提供多种细胞模型的构建及相应的细胞功能研究相关检测。